Theo người dân chứng kiến tại hiện trường vụ tai nạn, khoảng 15 giờ 20 phút chiều 6-7, ô tô khách loại 16 chỗ biển kiểm soát 51B-413.42 (chưa rõ tên tuổi tài xế) đi qua trạm thu phí Thân Cửu Nghĩa và ra đường dẫn cao tốc TP.HCM – Trung Lương.
Khi xe này đến điểm mở dải phân cách đoạn thuộc ấp 1, xã Tam Hiệp, huyện Châu Thành thì tài xế cho di chuyển chậm sát lề đường, nhưng sau đó xe này bất ngờ chuyển hướng qua đường theo điểm mở dải phân cách. Cùng thời điểm này, xe khách loại 29 chỗ biển kiểm soát 51B-096.26 cũng đang lưu thông từ trạm thu phí Thân Cửu Nghĩa ra ngoài. Tình huống xe 16 chỗ chuyển hướng qua đường bất ngờ khiến tài xế xe khách 29 chỗ phải điều khiển phương tiện tránh làm cho chiếc xe lao vào đầu dải phân cách.
